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三)、试验结果:初代培养:使用本发明的消毒方法,消毒成功率能达到80%,诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。继代培养:使用本发明的增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。生根培养:使用本发明的生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基,其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有:6-ba—6-苄氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。RPMI1640培养基能够提高细胞的存活率。重庆RPMI1640培养基是什么
1/2cs生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为8个。如图4所示。对比培养例4:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例4,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2ms生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为6个。如图4所示。培养实例4和对比培养例4的培养结果比较:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的存活率均为100%;在相同条件下培养16d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,其茎高、茎中粗、根的数量均优于1/2ms生长培养基。如图4所示。培养实例5:哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导(1)拟南芥叶片愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(2)拟南芥根愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+2,,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。海南RPMI1640培养基牌子无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。
第三节**的代谢与培养基新陈代谢(metabolism)足生物有机体基本的特征之一,是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。**吸收了外界的营养,在酶的作用下将其分解,再在酶的作用下台成**菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生,紧密相关,维持了**细胞的生命,进行**的生长。通过检测**系统及代谢产物的生理,来鉴定**的试验称生化试验。生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。l.代谢试验①氧化发酵试验O-F;②糖(醇)类发酵试验;③VP和甲基红试验2.蛋白质代谢试验①蛋白水解试验;②硫化氢试验;③吲哚试验;④脱羧酶试验;③脱氨试验;⑥尿素酶试验。3.盐类代谢试验①枸橼酸盐试验;②丙二酸盐利用试验;③硝酸盐还原试验4.呼吸酶类试验①氧化酶试验;②细胞色素氧化酶试验表IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用菌名吲哚(I)甲基红(M)VP(Vi)枸橼酸盐。
对于大多数哺乳类动物细胞,渗透压在260~320mOsm/kg的范围内都适宜。在生产、配制细胞培养基的过程中,渗透压的测定较为重要,有助于防止在生产、配制过程中出现称量等方面的错误。反应器高密度培养动物细胞过程,在添加碳酸氢钠的过程中注意渗透压的监控,防止渗透压过高对细胞的损害。温度温度对细胞培养基有较大的影响,温度过高可引起营养成份的降解或破坏,细胞培养基的pH、离子强度和电解常数pKa也可能受到影响。如细胞培养液中的谷氨酰胺,在高温条件下降解的速度较快,如35℃贮存时,放置3天降解25%左右,在4℃贮存3周降解约20%。粘滞性及表面张力含血清细胞培养液的粘滞性主要是由血清引起的,在转瓶培养贴壁细胞时,培养液的粘滞性对细胞生长没有多大影响;但在生物反应器悬浮培养细胞时,细胞培养液的粘滞性则直接影响搅拌转速控制及搅拌剪切力对细胞造成的损伤程度。表面张力对细胞培养有较大的作用,尤其在利用生物反应器进行悬浮培养时,搅拌和通气都会引起泡沫的产生。对于含血清培养液,由于血清中多种蛋白的存在,搅拌时产生的气泡较多,气泡的上升运动对细胞的损伤程度还有争议,但气泡的破裂对细胞有明显的损伤作用。为降低这种损伤。无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验。
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